蝙蝠也是利用这种方法计算距离的 。蝙蝠在飞行时始终张着口，从嘴里不断向外发射声波 。
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大部分蝙蝠发出的声音频率非常高，超出人类的听觉范围，但它们的发声方式与人类的喊叫方式是一样的 。蝙蝠发出的声波在空气中传播，遇到物体后反弹回来，蝙蝠会认真地倾听反射回来的声音 。蝙蝠的大脑在处理返回来的信息时，与我们人类大脑的加工方式是一样的 。通过确定声音的往返时间长度，蝙蝠就能计算出对面物体离它有多远 。
除了确定物体的距离，蝙蝠还能确定物体的具体方位和移动方向 。通过比较声音到达左耳和到达右耳之间的时间差，蝙蝠就能确定昆虫是向右飞还是向左飞 。如果回声先传到它的右耳，然后再传到它的左耳，昆虫显然就是向右飞，反之则是向左飞 。蝙蝠耳朵内有很多复杂的褶皱层，可以帮助它确定昆虫的声音的方位 。如果回声是从下方传来的，就会撞击它的外耳层，如果是从上方传来的，则会首先到达它的内耳层 。
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此外，蝙蝠还能根据回声的强弱和音调判断昆虫个头的大小及其移动方向 。较小物体反射回来的声波较弱，产生的回声强度也较弱 。如果昆虫远离蝙蝠而去，反射回来的音调比正常音调低，反之则高 。这种差别是多普勒效应的结果 。
蝙蝠对返回来的各种信息进行的加工和处理完全是无意识的，这与人类用眼睛和耳朵搜集、加工信息一样 。蝙蝠根据获取的声音信息在其头脑里形成回声定位图像 。除此之外，蝙蝠还能加工处理视觉信息 。与大多数人的看法相反，大部分蝙蝠的视觉功能实际上非常敏锐 。它们在进行回声定位时是结合视觉信号一起进行的，而不是单用其中的一种 。
除了用回声定位法导航外，某些蝙蝠还能利用紫外光导航 。在中美和南美的热带雨林里，生活着一种名叫G.soricina 的专以花蜜为食的蝙蝠 。科学家近来发现，这种蝙蝠在黎明时分觅食时能利用紫外光寻找含有丰富花蜜的花朵，因为花朵在黎明时会反射波长较短的紫外光 。
与鱼类、爬行类和鸟类不同，大多数现代哺乳动物的眼睛看不见紫外光，这是因为在我们眼球的晶体内有一个紫外线滤光器，如同我们戴了一副太阳镜 。而G.Soricina 蝙蝠在长期进化中失去了这种滤光器，因此它们能看见大多数哺乳动物看不见的许多光线 。
独特的生理机能
食虫类蝙蝠是一种昼伏夜出的动物，它们的生理机能也完全适应了这种生活方式 。它们在夜间活动，白天则栖息在各种洞穴内，如山洞、桥洞或内部中空的树洞，它们常常挑选一个地方一动不动地倒挂在那儿 。
蝙蝠为什么会采取倒挂这种栖息方式呢？
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科学家认为有两种原因：其一，这是为了起飞的需要 。蝙蝠与鸟类不同，由于它们的翅膀无法产生足够的升力脱离地面，因此不能依靠自己的力量从地上直接飞入空中 。其二，它们的后腿很小，发育不全，以至于它们无法借助奔跑来积聚必要的起飞速度，因此它们在起飞时必须用前爪先爬到一个较高的地方，然后再跌入空中 。
倒挂还是躲避敌害的一个好办法 。在白天，在大多数食肉动物活动的时候（主要是食肉性鸟类），蝙蝠挑选一个较高的、食肉动物看不见也到不了的地方，把自己倒挂在那儿睡觉，并做好随时起飞的准备 。那些地方很少有其他动物与蝙蝠竞争，因为其他飞禽没有头朝下倒悬的本领 。
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